Vol. 2° -  IV.2.

Criteri di classificazione dei cromosomi

Le caratteristiche del cromosoma di qualsiasi cellula di un qualsivoglia tessuto vengono stabilite in base ai seguenti criteri morfologici:

Πindice centromerico, condizionato dalla posizione del centromero sul cromatide

� costrizioni secondarie

Ž telomeri

� satelliti

� bande

Fig. IV. 1 - Criteri di identificazione di un cromosoma, ad eccezione delle bande.

2.1. Indice centromerico

Il centromero non occupa la stessa posizione in tutti i cromosomi e divide ogni cromatide in due parti, i bracci, la cui lunghezza dipende dalla posizione del cinetocore. Per lo più i bracci sono di lunghezza diversa, talvolta invece sono uguali. La posizione del centromero viene definita dal rapporto fra la lunghezza del braccio corto P (dal francese petit) e la somma tra lunghezza del braccio corto P con quella del braccio lungo Q:

Ic = P/P+Q

Fig. IV. 2 - Tipi diversi di cromosomi
A acrocentrico - B telocentrico - C submetacentrico - D metacentrico

La posizione del centromero permette di classificare i cromosomi in 4 tipi:

§   acrocentrici [1] : centromero in posizione terminale

§   telocentrici: centromero in posizione subterminale

§   submetacentrici: centromero in posizione submediana

§   metacentrici: centromero in posizione mediana

La classificazione delle prime 9 coppie di cromosomi del pollo, in base alla posizione del centromero, risale al 1967 e si deve a Shoffner, che ha numerato i cromosomi in ordine di grandezza decrescente.

Classificazione dei primi 9 cromosomi del Pollo
in base alla posizione del centromero

2.2. Costrizioni secondarie

Talvolta i bracci del cromosoma presentano una o più zone strette e chiare, definite costrizioni secondarie. Alcune costrizioni secondarie, non distinguibili morfologicamente dalle altre, sono intimamente associate alla formazione del nucleolo, che scompare alla fine della profase e ricompare nel nucleo delle cellule figlie. Queste particolari zone sono gli organizzatori nucleolari.

2.3. Telomeri

I telomeri sono le parti terminali di un cromosoma. Irradiando i cromosomi coi raggi X si ottengono frammenti che si risaldano fra loro e non si uniscono al telomero, la cui polarità ne impedisce l’unione con gli altri frammenti generati dall’irradiazione.

2.4. Satelliti

I satelliti sono elementi morfologici caratteristici, rotondeggianti o allungati, collegati all’estremità di un braccio attraverso un sottile filamento cromatinico. Talvolta il diametro di un satellite corrisponde a quello del braccio, altre volte è minore.

2.5. Bande cromosomiche

Le tecniche di colorazione con sostanze fluorescenti, oppure la colorazione dopo digestione enzimatica o dopo denaturazione termica, evidenziano un bandeggio cromosomico trasversale. Queste metodiche si sono sviluppate a partire dal 1970 e hanno permesso di riclassificare alcuni cromosomi. Esse non permettono solamente di distinguere cromosomi dotati di grandezza e morfologia simili, ma anche di individuare regioni specifiche con un enorme vantaggio nello studio delle anomalie. A seconda della tecnica utilizzata, si distinguono bande Q, C, G o R. Le bande C, G e R, scoperte empiricamente per ovviare al costoso sistema all’UV, sono basate sul fatto che un’area prossima al centromero si colora più intensamente col Giemsa rispetto al resto del cromosoma.

q bande Q: i cromosomi colorati con mostarda di Quinacrina, e osservati in fluorescenza, mostrano delle bande trasversali fluorescenti parallele, la cui disposizione è caratteristica per ciascun cromosoma

q bande C: queste bande vengono siglate da Constitutive, e si possono ottenere per denaturazione con una soluzione di urea riscaldata a 87°C

q bande G: le tecniche impiegate per ottenerle richiedono la colorazione con Giemsa; i cromosomi vengono trattati a temperatura ambiente con una soluzione di enzimi (pronasi, tripsina, a-chimotripsina); le bande ottenute sono simili alle bande Q

q bande R: sono il Reversal delle bande Q; si ottengono per denaturazione termica; i vetrini vengono immersi per 10-20 minuti in una soluzione di Earle a pH 6,5 riscaldata a 87°C.

Fig. IV. 3 - Cromosomi della gallina ottenuti con la tecnica per il bandeggio Q
I cromosomi da 1 a 5, secondo una classificazione corrente, appartengono ai macrocromosomi,
mentre i cromosomi da 6 a 9 appartengono già ai microcromosomi.

Le bande maggiori o bande di riferimento, landmark in inglese, vengono numerate a partire dal centromero in direzione della regione telomerica o distale; le bande più sottili sono numerate come suddivisioni dello spazio compreso tra le bande maggiori.